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一、甲组溶血性链球菌的快速检查法

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(一)试剂制备

用抗甲组溶血性链球菌的抗体,以FITC标记,制成荧光抗体,再用C和G链球菌充分吸收;或用抗I型链球菌M蛋白成分的血清,标记后吸收,都有可靠的特异性。

(二)检查方法

(1)以棉拭子擦拭患者咽部粘膜,取标本。

(2)将拭子浸入1ml肉汤小试管内,37℃培养2~3h。

(3)取出棉拭了作分离培养,常规鉴定。将肉汤液离心3~4min,3000r/min,弃上清,沉淀加0.01mol/l Ph7.2 PBS 洗涤,再离心沉淀,弃上清。

(4)以沉淀涂片,直径约1cm,涂两个圆形区。

(5)将标本放入95%酒精中固定1min,然后浸入PBS中洗1次,取出室温晾干。

(6)直接法染色,左侧标本作对照,加非溶血性链球菌荧光抗体染色。右侧加甲组溶血性链球菌荧光抗体染色。置湿盒中孵育20~30min,再用PBS洗2次,每次5min,振动洗涤,滤纸吸干标本周围的水。

(7)加缓冲甘油封裱,立即荧光显微镜观察。

免疫荧光检出的阳性率较培养法为高,因为前者可以检出抗菌素治疗后的死菌。二者符合率达95%。

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