中医书籍-->西医备考-->实用免疫细胞与核酸-->第十五章 自身抗体的免疫组织化学检测方法和应用-->第二节 在研究和诊断自身免疫性疾病中的应用-->八、肝细胞膜抗体(Antibodyto the hepatocyte membrane, HMA)的检测

八、肝细胞膜抗体(Antibodyto the hepatocyte membrane, HMA)的检测

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Lee等用Rouin氏液固定的大白鼠肝切片作抗原,作间接免疫荧光(IIF)检查,在慢性活动性肝炎(CAH)病人血清中成功的发现了HMA,肝细胞膜呈现黄绿色荧光,12例CAH中11例HMA阳性(93%)10例原发性胆汁性肝硬化(PBC)全部阳性,20例胶元-血管疾病1例阳性(5%)7例非免疫肝病中1例阳性(14%),正常人22例中仅1例阳性(5%)。

Bouin氏液固定大白鼠肝冰冻切片和IIF检查HMA的方法很简便,特异,对于诊断CAH和PBC,研究病因是很有价值的。

免疫荧光方法:取Wistar大白鼠复合组织(胃窦、肾皮质和髓质和肝)用恒冷箱冷冻切片机作冰冻切片,4μm厚,贴于玻片上,在空气中干燥至少30min。在室温中用Bouin氏液(75ml饱和苦味酸溶液,24ml甲醛,19ml冰醋酸)固定10min。切片在pH7.40.01mol/LPBS中洗3次,15min,同时搅拌,切片在空气中干燥后立即应用,或存放在-20℃备用。作间接免疫荧光染色。

表15-5 平滑肌抗体在不同疾病中的百分率

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