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三、胶体铁标记抗体的鉴定

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用免疫斑点法或免疫细胞化学染色等方法可鉴定抗体的标记效果

1.免疫斑点法  在处理好的硝酸纤维素膜上分别滴加100~10-7系列稀释的抗原,斑点直径0.25cm, 空气中干燥,80℃多聚甲醛蒸气固定1h,然后分别以胶体铁标记的抗体一步法或用桥抗联接胶体铁标记物的间接法染色,普鲁士蓝呈色观察。一步法所难检测到的抗原量为10-2~10-3μg,间接法 敏感性至少增加10倍(10-3~10-4μg)。

2.免疫细胞化学染色法 步骤同下,方法敏感性同免疫金银法(IGSS),优点是背景干净。

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