中医书籍-->西医备考-->实用免疫细胞与核酸-->第三章 免疫荧光细胞化学技术-->第二节 荧光抗体的制备-->一、荧光素-->(二)四乙基罗达明(tetraethylrodamineB200, RB200)

(二)四乙基罗达明(tetraethylrodamineB200, RB200)

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呈黄色、橙黄或褐黄色粉末或结晶,性质稳定,在室温下能保存2年以上,在低温中可保存多年。易溶于水和酒精。最大吸收光谱为490~495nm,最大发射光谱为520~530nm,呈现黄绿色荧光,分子量为398.4(图3-5)。

在碱性条件下,FITC的异硫氰酸基在水溶液中与免疫球蛋白的自由氨基经碳酰胺化而形成硫碳氨基键,成为标记荧光免疫球蛋白,即荧光抗体。反应式如下(图3-6):

一个Ig分子上最多能 标记15~20个FITC分子。

图3-5 FITC的吸收光谱和发射光谱

图3-6 抗体的FITC标记反应式

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